Ключевые особенности
| Особенность | Описание |
|---|---|
| Производитель / Бренд | Edvotek Inc. (США) |
| Каталожный номер | EVT-3013 (также известен как 3013) |
| Название | pGREEN: A Fluorescent Protein Transformation / Трансформация с флуоресцентным белком GFP |
| Количество учащихся / групп | 10 лабораторных групп (до 30 студентов при работе в парах) |
| Время выполнения | 45–60 минут (подготовка компетентных клеток и трансформация) + инкубация на ночь и анализ результатов |
| Цель эксперимента | Трансформация бактерий, селекция на среде с антибиотиком, индукция и наблюдение GFP |
| Уровень сложности | Средний / Продвинутый (рекомендуется для курсов молекулярной биологии и AP Biology) |
| Страна производства | США |
Технические характеристики
| Параметр | Значение |
|---|---|
| Тип набора | Лабораторный практикум по генной инженерии и молекулярной биологии |
| Объект трансформации | E. coli (штамм HB101 K-12) |
| Плазмида | pGREEN (содержит ген GFP и ген устойчивости к ампициллину) |
| Класс безопасности | BSL-1 (безопасный для учебных лабораторий) |
| Форма контроля | Визуальный подсчет колоний, наблюдение флуоресценции под УФ |
| Хранение компонентов | Некоторые компоненты требуют хранения при -20°C |
Комплектация (что входит в набор)
В набор входят все необходимые расходные материалы для проведения эксперимента :
| Категория | Компоненты |
|---|---|
| Биологические компоненты | Лиофилизированная плазмида pGREEN, лиофилизированные компетентные клетки E. coli HB101 K-12, среда LB, раствор для восстановления, раствор IPTG (индуктор) |
| Расходные материалы | Чашки Петри, пробирки, микропробирки, микропипетки (некоторые наборы могут включать одноразовые стерильные петли) |
| Питательные среды | Планшеты с LB-агаром (без антибиотика и с ампициллином) |
| Документация | Подробная инструкция для учителя и ученика с описанием протокола и контрольными вопросами |
Необходимое дополнительное оборудование и реактивы
Для проведения практикума требуется оборудование и материалы, которые не входят в набор и приобретаются отдельно :
| Категория | Необходимые компоненты |
|---|---|
| Лабораторное оборудование | Водяная баня на 42°C, источник УФ-света (длинноволновой, 365 нм) для наблюдения флуоресценции, микропипетки (P20, P200), наконечники, встряхивающий инкубатор (опционально) |
| Лабораторная посуда | Штативы для пробирок, лед, маркеры для стекла |
| Расходные материалы | Перчатки, дезинфицирующий раствор для рабочих поверхностей |
| Антибиотик | Ампициллин (если не входит в комплект) |
Этапы эксперимента
-
Подготовка: Ресуспендирование компетентных клеток E. coli в холодном буфере.
-
Трансформация: Добавление плазмиды pGREEN к клеткам и инкубация на льду.
-
Тепловой шок: Быстрое нагревание клеток при 42°C для стимуляции поглощения ДНК.
-
Восстановление: Добавление питательной среды и инкубация для экспрессии генов.
-
Посев: Высев клеток на чашки Петри:
-
LB (контроль роста)
-
LB/ампициллин (селекция трансформированных клеток)
-
LB/ампициллин + IPTG (индукция флуоресценции)
-
-
Инкубация: Чашки инкубируются при 37°C в течение ночи.
-
Анализ: Подсчет колоний, сравнение роста на разных средах, наблюдение флуоресценции под УФ-светом.
Область применения
Набор идеально подходит для :
| Уровень образования | Применение |
|---|---|
| Старшая школа (профильные классы) | Курсы AP Biology, углубленное изучение молекулярной биологии и генетики |
| Колледжи и вузы | Начальные курсы молекулярной биологии, биотехнологии, генной инженерии |
| Лабораторные практикумы | Отработка навыков асептической работы, трансформации, селекции |
| Повышение квалификации учителей | Освоение современных методов генной инженерии |
Нужна консультация?
Наши специалисты ответят на любой интересующий вопрос