Ключевые особенности
| Особенность | Описание |
|---|---|
| Производитель / Бренд | Edvotek Inc. (США) |
| Каталожный номер | 255 |
| Название | Purification and Size Determination of GFP/BFP Kit |
| Количество учащихся / групп | 6 лабораторных групп (3 геля) |
| Время выполнения | Колоночная хроматография — 45 мин; SDS-PAGE (опционально) — 60 мин; окрашивание — 30 мин; обесцвечивание — 2 часа |
| Цель эксперимента | Очистка рекомбинантных флуоресцентных белков GFP и BFP; определение их чистоты и молекулярной массы |
| Уровень сложности | Средний / Продвинутый |
| Источник белков | GFP из медузы Aequorea victoria, BFP — мутантная форма GFP |
Технические характеристики
| Параметр | Значение |
|---|---|
| Тип набора | Лабораторный практикум по белковой химии и хроматографии |
| Методы | Колоночная хроматография, флуоресцентная детекция, SDS-PAGE |
| Исследуемые объекты | GFP (Green Fluorescent Protein), BFP (Blue Fluorescent Protein) |
| Форма контроля | Визуальное наблюдение флуоресценции под УФ-лампой; анализ белковых полос на геле |
| Уровень образования | Старшая школа (профильные классы), начальные курсы колледжей и вузов |
Комплектация (что входит в набор)
Набор включает материалы для 6 групп студентов :
| Категория | Компоненты |
|---|---|
| Образцы | Экстракты E. coli, содержащие GFP и BFP; буферы |
| Хроматографические материалы | Хроматографические колонки, матрица для разделения |
| Материалы для SDS-PAGE (опционально) | Реагенты для белкового электрофореза |
| Документация | Подробная инструкция для учителя и ученика |
Необходимое дополнительное оборудование
Для проведения практикума требуется следующее оборудование, которое не входит в набор :
| Категория | Необходимые компоненты |
|---|---|
| Общее оборудование | Водяная баня, лабораторные штативы с зажимами, горячая плита |
| Для детекции | Длинноволновая УФ-лампа (365 нм) для наблюдения флуоресценции |
| Для электрофореза (опционально) | Аппарат для вертикального электрофореза (SDS-PAGE), источник питания, полиакриламидные гели (12%), автоматические микропипетки |
| Расходные материалы | Дистиллированная/деионизированная вода, перчатки |
Принцип эксперимента
-
Хроматографическая очистка: Студенты пропускают бактериальный экстракт через хроматографическую колонку. GFP и BFP обладают уникальным свойством связываться с определенными участниками матрицы, что позволяет отделить их от других клеточных белков .
-
Флуоресцентная детекция: Благодаря природной флуоресценции этих белков, фракции, содержащие GFP или BFP, легко идентифицировать: они светятся зеленым или синим светом под УФ-лампой .
-
Оценка чистоты и размера (опционально): Очищенные фракции белков можно разделить с помощью SDS-PAGE. Сравнивая положение полос на геле с белковым маркером, студенты определяют молекулярную массу GFP и BFP .
Область применения
Набор идеально подходит для :
| Уровень образования | Применение |
|---|---|
| Старшая школа (профильные классы) | Изучение методов белковой химии, хроматографии, электрофореза |
| Колледжи и вузы | Начальные курсы по биохимии, молекулярной биологии, биотехнологии |
| Лабораторные практикумы | Отработка навыков колоночной хроматографии и SDS-PAGE |
Условия хранения
| Компонент | Условия хранения |
|---|---|
| Набор при поставке | Комнатная температура |
| После получения | Некоторые компоненты требуют хранения при -20°C |
